在最近發(fā)表在Cell雜志上的一項(xiàng)研究中，一組研究人員闡明了癌癥和妊娠中共同的免疫耐受機(jī)制，重點(diǎn)研究了孕激素誘導(dǎo)的B7同源物4 (B7- h4)(一種免疫檢查點(diǎn)蛋白)作為腫瘤胎兒免疫耐受檢查點(diǎn)的作用(允許癌癥和胎兒細(xì)胞免疫共存的機(jī)制)。
免疫檢查點(diǎn)阻斷(ICB)在各種癌癥中引起持久的反應(yīng)。然而，由于關(guān)鍵的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制在腫瘤微環(huán)境(TME)中促進(jìn)抑制網(wǎng)絡(luò)，大多數(shù)患者對(duì)當(dāng)前的免疫治療沒有反應(yīng)。這導(dǎo)致癌癥免疫逃避和對(duì)ICB的抵抗。
妊娠是探索免疫耐受的理想模型，與癌癥共享關(guān)鍵的免疫抑制途徑，包括程序性死亡配體1 (PD-L1)、人白細(xì)胞抗原G (HLA-G)、吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)和Tregs。B7-H4靶向治療癌癥和妊娠相關(guān)免疫耐受的機(jī)制和治療潛力有待進(jìn)一步研究。
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，采用醋酸甲孕酮(MPA)和7,12-二甲基苯[A]蒽(DMBA)誘導(dǎo)自發(fā)性腫瘤模型。將年齡匹配的雌性野生型(WT)和B7-H4-/-小鼠皮下植入含有緩釋MPA的微丸。小鼠每周灌胃DMBA 1 mg，共6次。
監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)情況，記錄可評(píng)估的腫瘤數(shù)量。用卡尺測(cè)量腫瘤尺寸，計(jì)算腫瘤面積。監(jiān)測(cè)無腫瘤生存期和總生存期。為了建立可移植的腫瘤，從腫瘤結(jié)節(jié)中分離原代細(xì)胞，并皮下接種到WT小鼠體內(nèi)傳代。這些細(xì)胞被用來建立皮下移植腫瘤，用于米非司酮(RU486)、BD-9136或抗PD- l1治療模型。
將小鼠隨機(jī)分為治療組，監(jiān)測(cè)無腫瘤生存和總生存。小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(MEECs)上B7-H4的表達(dá)通過給藥RU486和收獲子宮分離細(xì)胞來檢測(cè)。
在妊娠模型中，將雌性C57BL/6 (WT)和B7-H4-/-小鼠分別與雄性Bagg Albino、C系(BALB/ C)(實(shí)驗(yàn)室小鼠常見近交系)和C57BL/6小鼠進(jìn)行異基因和同基因交配。在妊娠第13.5天對(duì)孕鼠實(shí)施安樂死，記錄全胎數(shù)和再吸收胎數(shù)。計(jì)算胎兒吸收率。分化簇(CD4)和CD8 T細(xì)胞(識(shí)別和破壞感染細(xì)胞或癌細(xì)胞的淋巴細(xì)胞)被特異性抗體耗盡，并通過流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)了耗盡效率。胚胎移植是通過用妊娠母馬血清促性腺激素(PMSG)和人絨毛膜促性腺激素(hCG)處理WT和B7-H4-/-雌性小鼠，與各自的雄性交配，并將兩細(xì)胞胚胎移植給受體小鼠進(jìn)行的。在妊娠第13.5或14.5天檢查妊娠結(jié)局。
研究結(jié)果
為了探索以前未被認(rèn)識(shí)的腫瘤胎兒免疫耐受機(jī)制，交叉分析了來自不同TME和胎盤的14個(gè)單細(xì)胞RNA測(cè)序(scRNA-seq)數(shù)據(jù)集，重點(diǎn)分析了腫瘤和滋養(yǎng)細(xì)胞的“非自體”細(xì)胞成分。考慮到主要組織相容性復(fù)合體(MHC)和輔助分子在免疫應(yīng)答中的重要性，我們?cè)u(píng)估了MHC、關(guān)鍵B7家族成員和TNF家族成員的表達(dá)模式。
該分析證實(shí)了先前報(bào)道的在腫瘤和滋養(yǎng)細(xì)胞中表達(dá)的關(guān)鍵基因。例如，在腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)高纖維蛋白原樣蛋白1 (FGL1)表達(dá)，在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)高HLA-G表達(dá)。有趣的是，B7-H4 V-Set Domain Containing T Cell Activation Inhibitor 1 (VTCN1)在TME和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞中被列為高表達(dá)的基因。因此，B7-H4轉(zhuǎn)錄本在TME和胎盤的主要細(xì)胞成分中均有表達(dá)。
將分析擴(kuò)展到腫瘤免疫單細(xì)胞中心2 (TISCH2)數(shù)據(jù)庫(kù)，比較B7-H4和PD-L1 (B7-H1, CD274)的表達(dá)模式。B7-H4主要在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，而包括髓系細(xì)胞在內(nèi)的不同細(xì)胞類型均廣泛表達(dá)PD-L1。在許多癌癥類型中，B7-H4轉(zhuǎn)錄物水平最高的是源于女性生殖器官的癌癥，如乳腺癌和卵巢癌。
該scRNA-seq數(shù)據(jù)分析與來自癌癥基因組圖譜(TCGA)的大量RNA-seq數(shù)據(jù)一致，顯示乳腺癌、卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌中B7-H4轉(zhuǎn)錄物水平最高。乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌中檢測(cè)到高水平的B7-H4蛋白，宮頸癌中檢測(cè)到中等水平的B7-H4蛋白。因此，B7-H4轉(zhuǎn)錄物和蛋白在泛婦科癌癥中高度表達(dá)。
在母胎界面，B7-H4主要由滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)。人類滋養(yǎng)細(xì)胞由解剖學(xué)和功能上不同的亞群組成，包括絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞(EVTs)、絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞(VCTs)和合胞滋養(yǎng)細(xì)胞(SCT)。我們分析了人類妊娠早期滋養(yǎng)細(xì)胞亞群中B7-H4轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)，這是建立母胎免疫耐受的關(guān)鍵階段。HLA-G主要在EVTs中表達(dá)，CD274在EVTs和SCT中表達(dá)，VTCN1在所有三個(gè)滋養(yǎng)細(xì)胞亞群中表達(dá)。在體外分化的EVTs中也檢測(cè)到VTCN1轉(zhuǎn)錄本。
免疫組化(IHC)染色顯示，人妊娠早期受胎細(xì)胞(POCs)的HLA-G+EVTs表達(dá)B7-H4蛋白。多重免疫組化染色顯示B7-H4和HLA-G在EVTs中同時(shí)表達(dá)。滋養(yǎng)細(xì)胞JEG-3(人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞系)也同時(shí)表達(dá)HLA-G和B7-H4。vct和SCT表達(dá)不同水平的B7-H4蛋白。與先前的報(bào)道一致，羊膜上皮細(xì)胞也表達(dá)B7-H4，在人母胎界面提供了另一種B7-H4+細(xì)胞類型。
結(jié)論
綜上所述，免疫耐受對(duì)于癌癥進(jìn)展和對(duì)ICB的抵抗以及懷孕期間胎兒的成功發(fā)育都是至關(guān)重要的。一些免疫抑制途徑，如PD-L1、HLA-G、吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)和Tregs，在TME和胎盤之間是共享的。
本研究確定B7-H4是一個(gè)以前未被識(shí)別的由孕激素信號(hào)驅(qū)動(dòng)的腫瘤胎兒免疫耐受檢查點(diǎn)。B7-H4支持TME和母胎界面的局部免疫抑制，確保這些部位在癌癥進(jìn)展和妊娠期間保持免疫特權(quán)。這種分子調(diào)控有助于更廣泛的細(xì)胞免疫抑制網(wǎng)絡(luò)，這對(duì)兩種情況下的免疫耐受至關(guān)重要。
（文章來源：www.ebiotrade.com/newsf/2024-7/20240712071732467.htm） | 
