診斷試劑盒的開(kāi)發(fā)和選擇
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所研究員/哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司董事長(zhǎng)王云峰在會(huì)上分享了禽病凈化試劑盒研究概況。他指出，動(dòng)物疫病檢測(cè)試劑盒對(duì)疫病控制、疾病凈化和動(dòng)物福利都有重要意義。當(dāng)前國(guó)內(nèi)通過(guò)注冊(cè)了14種禽病檢測(cè)試劑盒，主要集中在禽白血病和禽流感產(chǎn)品，但在雞沙門(mén)氏菌病領(lǐng)域只有凝集試驗(yàn)一個(gè)產(chǎn)品，在禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病、雞傳染性貧血的檢測(cè)能力和技術(shù)手段還有待提高。他認(rèn)為，開(kāi)發(fā)診斷試劑盒的技術(shù)難度和要求不比疫苗低。
王云峰認(rèn)為當(dāng)前檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)傳統(tǒng)技術(shù)應(yīng)用多，創(chuàng)新型技術(shù)應(yīng)用不足，但他也認(rèn)為能解決問(wèn)題的方法就是好的方法。他介紹了基于現(xiàn)有成熟技術(shù)路徑進(jìn)行的系列新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)工作，包括：禽白血病系列檢測(cè)技術(shù)，禽流感系列檢測(cè)技術(shù)，雞沙門(mén)氏菌病檢測(cè)技術(shù)，其他待凈化疾病檢測(cè)技術(shù)（如新城疫、禽支原體、雞毒支原體、雞傳染性法氏囊病等）。
普萊柯生物工程股份有限公司副總經(jīng)理/國(guó)家獸用藥品工程技術(shù)研究中心主任田克恭分享了不同應(yīng)用場(chǎng)景下豬病檢測(cè)方法的選擇與應(yīng)用。我國(guó)豬病種類(lèi)多、型別多、變異快，并且疫苗種類(lèi)多，免疫程序復(fù)雜，疫病診斷背景復(fù)雜，做好疫病診斷的難度比國(guó)外更大。田克恭舉例說(shuō)明了針對(duì)不同的檢測(cè)目的與應(yīng)用場(chǎng)景（如感染診斷、免疫評(píng)估、疫病凈化）應(yīng)注意的要點(diǎn)。
如選擇感染診斷用試劑盒，應(yīng)根據(jù)動(dòng)物疫病發(fā)生與發(fā)展過(guò)程，在感染診斷中選擇不同檢測(cè)方法應(yīng)用。以非洲豬瘟為例：2019年感染病毒滴度高，毒力強(qiáng)。早期核酸檢測(cè)是首選，感染后期ELISA抗體檢測(cè)試劑盒可發(fā)揮巨大作用。到了2023年上半年，感染后無(wú)明顯癥狀，病毒載量低，在核酸檢測(cè)的同時(shí)，要有好的抗體檢測(cè)方法。
選擇免疫評(píng)估用試劑盒，以口蹄疫為例，判斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)是與攻毒保護(hù)或病毒中和抗體具有良好相關(guān)性的。
選擇凈化監(jiān)測(cè)用試劑盒，以偽狂犬為例，選擇gE基因缺失疫苗+鑒別診斷試劑盒配合，在疫苗的免疫診斷上選擇gD蛋白優(yōu)于gB蛋白。田克恭認(rèn)為gD蛋白是偽狂犬病最重要的免疫保護(hù)相關(guān)蛋白，更適用于作為免疫效果評(píng)估但診斷靶標(biāo)，使用gD抗體檢測(cè)試劑盒用于免疫效果評(píng)價(jià)更科學(xué)。
2025年全球動(dòng)物診斷市場(chǎng)有望達(dá)到415億美元
動(dòng)物診斷行業(yè)在發(fā)達(dá)國(guó)家相對(duì)成熟，在我國(guó)處于初步階段。廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物衛(wèi)生研究所翟少倫研究員（廣州維伯鑫生物科技有限公司特邀嘉賓）分享了廣東省獸用診斷制品行業(yè)高質(zhì)量發(fā)展路徑與策略。根據(jù)Medical咨詢(xún)，2021年全球動(dòng)物診斷市場(chǎng)容量約370億美元，滲透率約為12.4%，預(yù)計(jì)2045年達(dá)到415億美元，中國(guó)等新興市場(chǎng)將迎來(lái)跨越發(fā)展。愛(ài)德士作為行業(yè)龍頭占據(jù)絕對(duì)領(lǐng)導(dǎo)地位，市場(chǎng)份額占比達(dá)到68%。
中國(guó)獸用診斷市場(chǎng)潛力巨大，發(fā)展迅速，華經(jīng)產(chǎn)業(yè)研究認(rèn)為2025年中國(guó)獸用診斷制品行業(yè)市場(chǎng)規(guī)?？蛇_(dá)131億元。2020年中國(guó)獸用診斷制品畜禽類(lèi)占比39.74%，寵物類(lèi)占比60.26%。廣東是中國(guó)獸用診斷制品生產(chǎn)企業(yè)最多的省份，擁有26家取得獸藥GMP和獸藥生產(chǎn)許可的生產(chǎn)企業(yè)（占全國(guó)的25%）。但廣東GMP企業(yè)多而不強(qiáng)，且行業(yè)呈現(xiàn)內(nèi)卷。
翟少倫研究員分享了廣東獸用診斷制品行業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的9條路徑和策略：1、圍繞國(guó)家重大需求、行業(yè)急需，研發(fā)注冊(cè)產(chǎn)品；2、熟悉國(guó)家獸用診斷制品注冊(cè)管理辦法；3、差異化產(chǎn)品布局發(fā)展；4、研、產(chǎn)、用緊密聯(lián)合研發(fā)新產(chǎn)品；5、堅(jiān)持產(chǎn)品質(zhì)量第一，促進(jìn)質(zhì)量提升；6、加強(qiáng)新產(chǎn)品宣傳，得到國(guó)內(nèi)客戶(hù)認(rèn)可；7、利用一帶一路、廣交會(huì)，拓展歐美、東南亞等市場(chǎng)；8、良性競(jìng)爭(zhēng)才能促進(jìn)行業(yè)發(fā)展；9、適時(shí)引入資本力量。
廣州敏捷生物技術(shù)有限公司技術(shù)總監(jiān)李立分享了時(shí)間分辨免疫熒光層析技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)中的應(yīng)用。該技術(shù)以納米稀土熒光微球?yàn)樯锸聚櫸?，整合了免疫熒光?biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)、側(cè)向免疫層析技術(shù)，是新一代的智能化快速檢測(cè)技術(shù)，擁有靈敏度高（最低可至pg/ml）、檢測(cè)速度快（最快短至3min）、試劑常溫儲(chǔ)存，既能定性又能定量測(cè)試，隨到隨做，適應(yīng)多檢測(cè)環(huán)境等顯著優(yōu)點(diǎn)；李立總監(jiān)還介紹了該技術(shù)在寵物醫(yī)院、養(yǎng)殖場(chǎng)抗原抗體檢測(cè)、飼料霉菌毒素等不同場(chǎng)景下的應(yīng)用。
做好疫病監(jiān)測(cè)，抓住關(guān)鍵PRDC相關(guān)疾病防控
做好監(jiān)測(cè)預(yù)警對(duì)動(dòng)物疫病整體防控意義重大。廣東省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心盧受昇副主任分享動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)預(yù)警模式探討。他分享了廣東省監(jiān)測(cè)預(yù)警的歷年數(shù)據(jù)，討論了實(shí)現(xiàn)監(jiān)測(cè)預(yù)警的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。他認(rèn)為，預(yù)警需要足夠長(zhǎng)的全面真實(shí)的歷史；從農(nóng)場(chǎng)到餐桌供應(yīng)鏈的各個(gè)環(huán)節(jié)陽(yáng)性率是緊密聯(lián)系的一個(gè)系統(tǒng)；統(tǒng)籌考慮大生態(tài)系，擴(kuò)大監(jiān)測(cè)廣度；聯(lián)系社會(huì)、經(jīng)濟(jì)因素，擴(kuò)充監(jiān)測(cè)維度；充分應(yīng)用好新的生物、信息技術(shù)；每個(gè)場(chǎng)、每個(gè)單位根據(jù)自身實(shí)際開(kāi)展監(jiān)測(cè)，久久為功，建立基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)，都能實(shí)現(xiàn)一定程度的預(yù)警。
勃林格股格翰動(dòng)物保?。?/span>BI）全國(guó)資深技術(shù)服務(wù)經(jīng)理唐閆利分享了豬場(chǎng)SHK健康管理體系的概念與整體解決方案。BI以臨床癥狀和剖檢變化為基礎(chǔ)，結(jié)合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室診斷和生產(chǎn)管理等，對(duì)多個(gè)疾病進(jìn)行防治，發(fā)展成為一套SHK健康管理體系。SHK全稱(chēng)為Swine Health Key，核心在于幫助豬場(chǎng)鎖定關(guān)鍵病原，厘清疫病防控思路。BI定義了10種關(guān)鍵疾病，其中5種屬于PRDC相關(guān)疾病。唐閆利介紹，BI在全國(guó)范圍內(nèi)進(jìn)行了PRDC大數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)藍(lán)耳、圓環(huán)在養(yǎng)殖場(chǎng)同時(shí)存在的養(yǎng)殖場(chǎng)檢出率超過(guò)90%，二者同時(shí)陰性的養(yǎng)殖場(chǎng)幾乎為0。基于調(diào)查結(jié)果BI提出SHK健康管理解決方案：1、監(jiān)測(cè)預(yù)警診斷；2、預(yù)防治療；3、優(yōu)化生產(chǎn)；4、生物安全體系。
江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所邵國(guó)青研究員分享了豬支原體肺炎防控技術(shù)與效力評(píng)價(jià)。支原體是世界范圍內(nèi)流行的最重要的豬細(xì)菌病，其病原穩(wěn)定，血清型單一。他認(rèn)為當(dāng)前支原體肺炎防控關(guān)鍵技術(shù)基本清楚，在解決措施上有變化。邵國(guó)青回顧了支原體的發(fā)現(xiàn)與疫苗研究歷程。他認(rèn)為活疫苗和滅活苗均有免疫效果，但與病毒疫苗相比效果差別較大。
氣喘病發(fā)生有三大特點(diǎn)：增殖傳播非常慢，進(jìn)行性病變演化，持續(xù)感染期超長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。豬只出現(xiàn)癥狀在18個(gè)月左右，我國(guó)在13-14周可產(chǎn)生明顯癥狀。
邵國(guó)青認(rèn)為肺炎支原體繁殖緩慢的特性為阻斷其傳播帶來(lái)思路，堅(jiān)持長(zhǎng)期免疫是保護(hù)的方法。健康管理與生物安全是發(fā)揮疫苗效力的前提，可使疫苗免疫和藥物選擇相配合。
邵國(guó)青介紹了疫苗的種類(lèi)和時(shí)機(jī)選擇。我國(guó)168株支原體肺炎活疫苗截止2023年簽發(fā)110批，市場(chǎng)使用超過(guò)1億頭份，臨床統(tǒng)計(jì)保護(hù)有效率平均80%，對(duì)易感的中國(guó)土豬尤其有效，一針靶向免疫，保護(hù)期大于9個(gè)月。他還介紹了其他免疫途徑，包括：靶向免疫、氣霧免疫、肌肉注射免疫、鼻腔內(nèi)免疫等。邵國(guó)青認(rèn)為氣喘病的凈化對(duì)當(dāng)前的規(guī)模化養(yǎng)豬意義重大。
多種病毒可引發(fā)腹瀉，S-indel毒株P(guān)EDV比例上升值得關(guān)注
下午，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)肖少波教授分享了豬病毒性腹瀉及其防控措施。從2022年的臨床樣品PEDV測(cè)序分析情況來(lái)看，G2型變異株仍是主流，G2a、G2b共存是當(dāng)前防控的難點(diǎn)，S-indel毒株比例上升值得關(guān)注。肖少波介紹，遺傳進(jìn)化分析顯示S-indel毒株是G2型和G1型的重組毒株，毒力弱于G1、G2毒株。其是否與最近流行的懷孕母豬“腹瀉+流產(chǎn)”情況相關(guān)尚無(wú)定論。
除了PEDV，豬Delta冠狀病毒（PDCoV）有上升趨勢(shì)，在全國(guó)抗原陽(yáng)性率在10-33%。除了引起腹瀉，其組織嗜性廣泛，可以感染豬肺泡巨噬細(xì)胞，提升藍(lán)耳感染率，提高臨床發(fā)病嚴(yán)重程度。中國(guó)PDCoV毒株相對(duì)穩(wěn)定，但肖少波提示東南亞毒株可能已經(jīng)傳入我國(guó)。去年開(kāi)始出現(xiàn)單純感染PDCov引起仔豬腹瀉脫水死亡的案例，說(shuō)明其毒力出現(xiàn)提升。
此外，豬輪狀病毒卷土重來(lái)，2022年?yáng)|北地區(qū)流行性高達(dá)77.94%，先發(fā)輪狀再發(fā)PEDV的情況非常多。臨床上豬腸道冠狀病毒與輪狀病毒混合感染嚴(yán)重。
肖少波介紹了有效防控豬病毒性腹瀉的幾點(diǎn)措施：做好全面生物安全，開(kāi)展定期病原檢測(cè)，選擇有針對(duì)性的疫苗，制定合理的免疫程序。他指出，PEDV不同血清型交叉保護(hù)力有限，探索開(kāi)發(fā)多血清型疫苗進(jìn)行防控。
天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司家畜技術(shù)總監(jiān)肖龍分享了豬場(chǎng)病毒性腹瀉的流行與防控，他詳細(xì)列舉了豬消化道腹瀉病毒分類(lèi)，并介紹了PEDV、PoRV近年來(lái)的流行態(tài)勢(shì)。肖龍建議豬場(chǎng)建立病毒性腹瀉監(jiān)測(cè)預(yù)警計(jì)劃。包括，后備豬做引種前、馴化后、入群前的豬群及環(huán)境監(jiān)測(cè)；繁殖母豬每月或每季度進(jìn)行病毒性腹瀉和常見(jiàn)細(xì)菌監(jiān)測(cè)；針對(duì)來(lái)自不同豬場(chǎng)的仔豬，每月或每季度進(jìn)行病毒性腹瀉和常見(jiàn)細(xì)菌監(jiān)測(cè)；針對(duì)發(fā)病豬群，可立即安排采集病料、血清或者棉拭子進(jìn)行針對(duì)性的檢測(cè)；每周發(fā)布全國(guó)區(qū)域疫病流行調(diào)研報(bào)告。
數(shù)字PCR擁有優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景
東莞市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心正高級(jí)獸醫(yī)師張險(xiǎn)朋（伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品(上海)有限公司特邀嘉賓）分享了微滴式數(shù)字PCR在動(dòng)物疫病檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用。數(shù)字PCR可以將指數(shù)型函數(shù)轉(zhuǎn)化成線性函數(shù)，對(duì)模板進(jìn)行有限稀釋?zhuān)鶕?jù)熒光信號(hào)的有或無(wú)進(jìn)行精確定量，稱(chēng)為第三代PCR技術(shù)。目前數(shù)字PCR方法在食品致病菌、動(dòng)物植物源性疾病的診斷等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。他詳細(xì)介紹了動(dòng)物疫病數(shù)字PCR的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)建立情況以及微滴式數(shù)字PCR在動(dòng)物疫病領(lǐng)域的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。他認(rèn)為數(shù)字PCR技術(shù)在低病原濃度樣品檢測(cè)和標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物疫病的樣品標(biāo)定種具有天然優(yōu)勢(shì)，可以做到絕對(duì)定量，并且該方法日趨成熟，相信未來(lái)隨著成本降低，數(shù)字PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)種將得到廣泛應(yīng)用。
羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司資深科研價(jià)值專(zhuān)家彭鑫進(jìn)行了動(dòng)物病原體高靈敏多重檢測(cè)——數(shù)字PCR系統(tǒng)介紹。數(shù)字PCR的獨(dú)特特性使其具有影響腫瘤學(xué)、傳染病、移植和其他領(lǐng)域的臨床研究的巨大潛力。他談到LightCyclerR數(shù)字PCR系統(tǒng)擁有3種不同配置納米孔芯片涵蓋多種應(yīng)用，6組先進(jìn)的檢測(cè)通道，5倍濃縮的DNA和RNA預(yù)混液。實(shí)現(xiàn)靈敏度、精確性、靈活性、工作流整合4大關(guān)鍵領(lǐng)域的進(jìn)步，提升臨床研究。
廣東澳美實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)裝備有限公司總經(jīng)理周煥楊分享生物安全實(shí)驗(yàn)室智能化應(yīng)用及建設(shè)，包括實(shí)驗(yàn)室空氣調(diào)節(jié)智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室門(mén)禁視頻智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室照明智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室集中供氣及污水處理智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室能耗管理及用電安全智能化監(jiān)控系統(tǒng)等。他暢想了實(shí)驗(yàn)室智能化應(yīng)用未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)，如融入AI人工智能用于實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理等。
獸醫(yī)診斷與生物制品分會(huì)12場(chǎng)報(bào)告內(nèi)容豐富，有專(zhuān)家也有企業(yè)代表，涉及診斷、疫苗、生物安全、實(shí)驗(yàn)室建設(shè)等，與會(huì)嘉賓收獲滿(mǎn)滿(mǎn)。會(huì)長(zhǎng)張建峰談到，本屆論壇是今年廣東省畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)診斷與生物制品分會(huì)成立以來(lái)的首次論壇，后續(xù)還將舉辦更多交流活動(dòng)，助力廣東省獸用生物制品行業(yè)在國(guó)內(nèi)保持競(jìng)爭(zhēng)力。
（文章來(lái)源：mp.weixin.qq.com/s/）
