診斷試劑盒的開發(fā)和選擇
中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所研究員/哈爾濱國生生物科技股份有限公司董事長王云峰在會上分享了禽病凈化試劑盒研究概況。他指出，動物疫病檢測試劑盒對疫病控制、疾病凈化和動物福利都有重要意義。當前國內(nèi)通過注冊了14種禽病檢測試劑盒，主要集中在禽白血病和禽流感產(chǎn)品，但在雞沙門氏菌病領域只有凝集試驗一個產(chǎn)品，在禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病、雞傳染性貧血的檢測能力和技術手段還有待提高。他認為，開發(fā)診斷試劑盒的技術難度和要求不比疫苗低。
王云峰認為當前檢測試劑盒開發(fā)傳統(tǒng)技術應用多，創(chuàng)新型技術應用不足，但他也認為能解決問題的方法就是好的方法。他介紹了基于現(xiàn)有成熟技術路徑進行的系列新產(chǎn)品的開發(fā)工作，包括：禽白血病系列檢測技術，禽流感系列檢測技術，雞沙門氏菌病檢測技術，其他待凈化疾病檢測技術（如新城疫、禽支原體、雞毒支原體、雞傳染性法氏囊病等）。
普萊柯生物工程股份有限公司副總經(jīng)理/國家獸用藥品工程技術研究中心主任田克恭分享了不同應用場景下豬病檢測方法的選擇與應用。我國豬病種類多、型別多、變異快，并且疫苗種類多，免疫程序復雜，疫病診斷背景復雜，做好疫病診斷的難度比國外更大。田克恭舉例說明了針對不同的檢測目的與應用場景（如感染診斷、免疫評估、疫病凈化）應注意的要點。
如選擇感染診斷用試劑盒，應根據(jù)動物疫病發(fā)生與發(fā)展過程，在感染診斷中選擇不同檢測方法應用。以非洲豬瘟為例：2019年感染病毒滴度高，毒力強。早期核酸檢測是首選，感染后期ELISA抗體檢測試劑盒可發(fā)揮巨大作用。到了2023年上半年，感染后無明顯癥狀，病毒載量低，在核酸檢測的同時，要有好的抗體檢測方法。
選擇免疫評估用試劑盒，以口蹄疫為例，判斷標準應是與攻毒保護或病毒中和抗體具有良好相關性的。
選擇凈化監(jiān)測用試劑盒，以偽狂犬為例，選擇gE基因缺失疫苗+鑒別診斷試劑盒配合，在疫苗的免疫診斷上選擇gD蛋白優(yōu)于gB蛋白。田克恭認為gD蛋白是偽狂犬病最重要的免疫保護相關蛋白，更適用于作為免疫效果評估但診斷靶標，使用gD抗體檢測試劑盒用于免疫效果評價更科學。
2025年全球動物診斷市場有望達到415億美元
動物診斷行業(yè)在發(fā)達國家相對成熟，在我國處于初步階段。廣東省農(nóng)業(yè)科學院動物衛(wèi)生研究所翟少倫研究員（廣州維伯鑫生物科技有限公司特邀嘉賓）分享了廣東省獸用診斷制品行業(yè)高質(zhì)量發(fā)展路徑與策略。根據(jù)Medical咨詢，2021年全球動物診斷市場容量約370億美元，滲透率約為12.4%，預計2045年達到415億美元，中國等新興市場將迎來跨越發(fā)展。愛德士作為行業(yè)龍頭占據(jù)絕對領導地位，市場份額占比達到68%。
中國獸用診斷市場潛力巨大，發(fā)展迅速，華經(jīng)產(chǎn)業(yè)研究認為2025年中國獸用診斷制品行業(yè)市場規(guī)模可達131億元。2020年中國獸用診斷制品畜禽類占比39.74%，寵物類占比60.26%。廣東是中國獸用診斷制品生產(chǎn)企業(yè)最多的省份，擁有26家取得獸藥GMP和獸藥生產(chǎn)許可的生產(chǎn)企業(yè)（占全國的25%）。但廣東GMP企業(yè)多而不強，且行業(yè)呈現(xiàn)內(nèi)卷。
翟少倫研究員分享了廣東獸用診斷制品行業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的9條路徑和策略：1、圍繞國家重大需求、行業(yè)急需，研發(fā)注冊產(chǎn)品；2、熟悉國家獸用診斷制品注冊管理辦法；3、差異化產(chǎn)品布局發(fā)展；4、研、產(chǎn)、用緊密聯(lián)合研發(fā)新產(chǎn)品；5、堅持產(chǎn)品質(zhì)量第一，促進質(zhì)量提升；6、加強新產(chǎn)品宣傳，得到國內(nèi)客戶認可；7、利用一帶一路、廣交會，拓展歐美、東南亞等市場；8、良性競爭才能促進行業(yè)發(fā)展；9、適時引入資本力量。
廣州敏捷生物技術有限公司技術總監(jiān)李立分享了時間分辨免疫熒光層析技術在動物疫病檢測中的應用。該技術以納米稀土熒光微球為生物示蹤物，整合了免疫熒光標記技術、免疫檢測技術、側(cè)向免疫層析技術，是新一代的智能化快速檢測技術，擁有靈敏度高（最低可至pg/ml）、檢測速度快（最快短至3min）、試劑常溫儲存，既能定性又能定量測試，隨到隨做，適應多檢測環(huán)境等顯著優(yōu)點；李立總監(jiān)還介紹了該技術在寵物醫(yī)院、養(yǎng)殖場抗原抗體檢測、飼料霉菌毒素等不同場景下的應用。
做好疫病監(jiān)測，抓住關鍵PRDC相關疾病防控
做好監(jiān)測預警對動物疫病整體防控意義重大。廣東省動物疫病預防控制中心盧受昇副主任分享動物疫病監(jiān)測預警模式探討。他分享了廣東省監(jiān)測預警的歷年數(shù)據(jù)，討論了實現(xiàn)監(jiān)測預警的幾個關鍵點。他認為，預警需要足夠長的全面真實的歷史；從農(nóng)場到餐桌供應鏈的各個環(huán)節(jié)陽性率是緊密聯(lián)系的一個系統(tǒng)；統(tǒng)籌考慮大生態(tài)系，擴大監(jiān)測廣度；聯(lián)系社會、經(jīng)濟因素，擴充監(jiān)測維度；充分應用好新的生物、信息技術；每個場、每個單位根據(jù)自身實際開展監(jiān)測，久久為功，建立基礎數(shù)據(jù)庫，都能實現(xiàn)一定程度的預警。
勃林格股格翰動物保健（BI）全國資深技術服務經(jīng)理唐閆利分享了豬場SHK健康管理體系的概念與整體解決方案。BI以臨床癥狀和剖檢變化為基礎，結(jié)合創(chuàng)新實驗室診斷和生產(chǎn)管理等，對多個疾病進行防治，發(fā)展成為一套SHK健康管理體系。SHK全稱為Swine Health Key，核心在于幫助豬場鎖定關鍵病原，厘清疫病防控思路。BI定義了10種關鍵疾病，其中5種屬于PRDC相關疾病。唐閆利介紹，BI在全國范圍內(nèi)進行了PRDC大數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)藍耳、圓環(huán)在養(yǎng)殖場同時存在的養(yǎng)殖場檢出率超過90%，二者同時陰性的養(yǎng)殖場幾乎為0。基于調(diào)查結(jié)果BI提出SHK健康管理解決方案：1、監(jiān)測預警診斷；2、預防治療；3、優(yōu)化生產(chǎn)；4、生物安全體系。
江蘇省農(nóng)業(yè)科學院獸醫(yī)研究所邵國青研究員分享了豬支原體肺炎防控技術與效力評價。支原體是世界范圍內(nèi)流行的最重要的豬細菌病，其病原穩(wěn)定，血清型單一。他認為當前支原體肺炎防控關鍵技術基本清楚，在解決措施上有變化。邵國青回顧了支原體的發(fā)現(xiàn)與疫苗研究歷程。他認為活疫苗和滅活苗均有免疫效果，但與病毒疫苗相比效果差別較大。
氣喘病發(fā)生有三大特點：增殖傳播非常慢，進行性病變演化，持續(xù)感染期超長達6個月。豬只出現(xiàn)癥狀在18個月左右，我國在13-14周可產(chǎn)生明顯癥狀。
邵國青認為肺炎支原體繁殖緩慢的特性為阻斷其傳播帶來思路，堅持長期免疫是保護的方法。健康管理與生物安全是發(fā)揮疫苗效力的前提，可使疫苗免疫和藥物選擇相配合。
邵國青介紹了疫苗的種類和時機選擇。我國168株支原體肺炎活疫苗截止2023年簽發(fā)110批，市場使用超過1億頭份，臨床統(tǒng)計保護有效率平均80%，對易感的中國土豬尤其有效，一針靶向免疫，保護期大于9個月。他還介紹了其他免疫途徑，包括：靶向免疫、氣霧免疫、肌肉注射免疫、鼻腔內(nèi)免疫等。邵國青認為氣喘病的凈化對當前的規(guī)?；B(yǎng)豬意義重大。
多種病毒可引發(fā)腹瀉，S-indel毒株PEDV比例上升值得關注
下午，華中農(nóng)業(yè)大學肖少波教授分享了豬病毒性腹瀉及其防控措施。從2022年的臨床樣品PEDV測序分析情況來看，G2型變異株仍是主流，G2a、G2b共存是當前防控的難點，S-indel毒株比例上升值得關注。肖少波介紹，遺傳進化分析顯示S-indel毒株是G2型和G1型的重組毒株，毒力弱于G1、G2毒株。其是否與最近流行的懷孕母豬“腹瀉+流產(chǎn)”情況相關尚無定論。
除了PEDV，豬Delta冠狀病毒（PDCoV）有上升趨勢，在全國抗原陽性率在10-33%。除了引起腹瀉，其組織嗜性廣泛，可以感染豬肺泡巨噬細胞，提升藍耳感染率，提高臨床發(fā)病嚴重程度。中國PDCoV毒株相對穩(wěn)定，但肖少波提示東南亞毒株可能已經(jīng)傳入我國。去年開始出現(xiàn)單純感染PDCov引起仔豬腹瀉脫水死亡的案例，說明其毒力出現(xiàn)提升。
此外，豬輪狀病毒卷土重來，2022年東北地區(qū)流行性高達77.94%，先發(fā)輪狀再發(fā)PEDV的情況非常多。臨床上豬腸道冠狀病毒與輪狀病毒混合感染嚴重。
肖少波介紹了有效防控豬病毒性腹瀉的幾點措施：做好全面生物安全，開展定期病原檢測，選擇有針對性的疫苗，制定合理的免疫程序。他指出，PEDV不同血清型交叉保護力有限，探索開發(fā)多血清型疫苗進行防控。
天津瑞普生物技術股份有限公司家畜技術總監(jiān)肖龍分享了豬場病毒性腹瀉的流行與防控，他詳細列舉了豬消化道腹瀉病毒分類，并介紹了PEDV、PoRV近年來的流行態(tài)勢。肖龍建議豬場建立病毒性腹瀉監(jiān)測預警計劃。包括，后備豬做引種前、馴化后、入群前的豬群及環(huán)境監(jiān)測；繁殖母豬每月或每季度進行病毒性腹瀉和常見細菌監(jiān)測；針對來自不同豬場的仔豬，每月或每季度進行病毒性腹瀉和常見細菌監(jiān)測；針對發(fā)病豬群，可立即安排采集病料、血清或者棉拭子進行針對性的檢測；每周發(fā)布全國區(qū)域疫病流行調(diào)研報告。
東莞市動物疫病預防控制中心正高級獸醫(yī)師張險朋（伯樂生命醫(yī)學產(chǎn)品(上海)有限公司特邀嘉賓）分享了微滴式數(shù)字PCR在動物疫病檢測領域的應用。數(shù)字PCR可以將指數(shù)型函數(shù)轉(zhuǎn)化成線性函數(shù)，對模板進行有限稀釋，根據(jù)熒光信號的有或無進行精確定量，稱為第三代PCR技術。目前數(shù)字PCR方法在食品致病菌、動物植物源性疾病的診斷等領域得到了廣泛的應用。他詳細介紹了動物疫病數(shù)字PCR的檢測標準建立情況以及微滴式數(shù)字PCR在動物疫病領域的應用優(yōu)勢。他認為數(shù)字PCR技術在低病原濃度樣品檢測和標準動物疫病的樣品標定種具有天然優(yōu)勢，可以做到絕對定量，并且該方法日趨成熟，相信未來隨著成本降低，數(shù)字PCR技術在動物疫病檢測種將得到廣泛應用。
羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司資深科研價值專家彭鑫進行了動物病原體高靈敏多重檢測——數(shù)字PCR系統(tǒng)介紹。數(shù)字PCR的獨特特性使其具有影響腫瘤學、傳染病、移植和其他領域的臨床研究的巨大潛力。他談到LightCyclerR數(shù)字PCR系統(tǒng)擁有3種不同配置納米孔芯片涵蓋多種應用，6組先進的檢測通道，5倍濃縮的DNA和RNA預混液。實現(xiàn)靈敏度、精確性、靈活性、工作流整合4大關鍵領域的進步，提升臨床研究。
廣東澳美實驗室系統(tǒng)裝備有限公司總經(jīng)理周煥楊分享生物安全實驗室智能化應用及建設，包括實驗室空氣調(diào)節(jié)智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實驗室門禁視頻智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實驗室照明智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實驗室集中供氣及污水處理智能化監(jiān)控系統(tǒng)，實驗室能耗管理及用電安全智能化監(jiān)控系統(tǒng)等。他暢想了實驗室智能化應用未來的發(fā)展趨勢，如融入AI人工智能用于實驗室建設和管理等。
獸醫(yī)診斷與生物制品分會12場報告內(nèi)容豐富，有專家也有企業(yè)代表，涉及診斷、疫苗、生物安全、實驗室建設等，與會嘉賓收獲滿滿。會長張建峰談到，本屆論壇是今年廣東省畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)診斷與生物制品分會成立以來的首次論壇，后續(xù)還將舉辦更多交流活動，助力廣東省獸用生物制品行業(yè)在國內(nèi)保持競爭力。
（文章來源：mp.weixin.qq.com/s/）
